穩(wěn)定細胞株是一種用于大量且穩(wěn)定表達蛋白的一種方式，不僅可以表達蛋白，而且還能進行相關(guān)藥物篩選以及基因表達，使用范圍非常的廣泛。但是，對于很多企業(yè)來說，都不會選擇通過構(gòu)建穩(wěn)定細胞株來表達蛋白，因為對于他們來說，穩(wěn)定細胞株構(gòu)建非常的困難，性價比相對較低。為什么穩(wěn)定細胞株構(gòu)建這么困難呢?下面，普健生物和大家具體聊聊。

　　我們知道，外源基因的表達主要采用兩種方式，一種是瞬時表達，另外一種是穩(wěn)定表達。

　　瞬時表達：將外源DNA克隆到質(zhì)粒中，而非將其整合到宿主細胞的染色體中。瞬時表達能夠迅速實現(xiàn)蛋白的表達，但是也只能持續(xù)幾天。瞬時表達的穩(wěn)定性相對較差，而且在不同實驗中差異性較大，且無法長久;

　　穩(wěn)定表達：直接將外源DNA整合到宿主細胞的染色體中，通過細胞篩選的方式，實現(xiàn)宿主細胞長期表達目的蛋白的方式;

　　但是，問題出現(xiàn)了。想要將外源基因整合到宿主細胞的染色體中相對困難，成功率非常的低，通常會發(fā)生隨機整合，表達水平會受到整合位置、周圍染色體原件等因素的影響。所以，如果我們想要獲得能夠進行穩(wěn)定表達，則需要進行大量的篩選工作。

　　什么情況下需要構(gòu)建穩(wěn)定細胞株?

　　1、對于那些需要長期研究的目標細胞來說，可以通過構(gòu)建穩(wěn)定細胞株來實現(xiàn);

　　2、對于一些半衰期極長，盡可以通過RNA干擾卻無法表達的蛋白，只有通過穩(wěn)定細胞株來實現(xiàn);

　　3、對于那些無法進行精確表達的細胞;

　　4、需要用到細胞的;

　　穩(wěn)定細胞株的構(gòu)建要點有哪些?

　　穩(wěn)定細胞株構(gòu)建是一個長期的過程，所以，從質(zhì)粒構(gòu)建、病毒包裝、細胞感染以到細胞篩選等過程，都需要引起注意，因為任何一個細節(jié)方面的錯誤都可能造成耗時大半年的項目付諸流水。

　　穩(wěn)定細胞株構(gòu)建能夠在極大程度上解決蛋白穩(wěn)定表達的問題，對于一些需要長期制備或者需要進行細胞的長期研究時，都可以通過穩(wěn)定細胞株來解決。當然了，對于穩(wěn)定細胞株的構(gòu)建，除了需要相關(guān)技術(shù)支持外，還需要有精細且細節(jié)方面的操作，只有在各個方面做好了，才能在更大程度上保證其構(gòu)建成功。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供穩(wěn)定細胞株構(gòu)建服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。