穩(wěn)定細胞株篩選技術(shù)在生物技術(shù)工程中是一項非常常用的技術(shù)，通過這個操作，能夠篩選出可以穩(wěn)定表達目的基因的細胞株。我們知道，穩(wěn)定細胞株構(gòu)建的目的就是為了能夠得到可以持續(xù)表達的細胞，所以，篩選過程類似提純的過程。那么，穩(wěn)定細胞株篩選的一般流程是怎樣的呢?今天，普健生物就和大家具體聊聊。

　　1、載體構(gòu)建。選擇合適的載體，然后將目的基因的DAN序列或蛋白編碼序列克隆到合適的表達載體中，并構(gòu)建成重組質(zhì)粒;

　　2、細胞轉(zhuǎn)染。將構(gòu)建好的載體通過試單更多技術(shù)轉(zhuǎn)染到目標細胞中(通常采用化學發(fā)、電穿孔法或病毒載體介導等方法)，通過細胞來進行目標蛋白的表達;

　　3、選擇標記引入。轉(zhuǎn)染后，將選中標記引入到細胞培養(yǎng)基中，從中挑選包含標記的細胞繼續(xù)培養(yǎng)，無標記的則剔除掉(這個方法對蛋白表達本身沒有太大意義，但是能夠幫助我們挑選出包含目的基因的細胞);

　　4、單克隆挑選。將進過篩選后的細胞進行單克隆培養(yǎng)，篩選出能夠穩(wěn)定表達且高表達的細胞，并對其進行克隆;

　　5、穩(wěn)定性驗證。對穩(wěn)定細胞系進行驗證，確保目的基因的穩(wěn)定高效表達;

　　6、功能性驗證。對穩(wěn)定細胞株進行功能型驗證，以確保所得蛋白能夠我們的需求;

　　總的來說，穩(wěn)定細胞株篩選是一個非常復雜的過程，需要具備相當程度的耐性和細心，知道獲得自己所需目的基因的細胞株為止。普健生物作為一家具備多年蛋白抗體制備和定制經(jīng)驗的公司，專業(yè)為您提供穩(wěn)定細胞株構(gòu)建及篩選服務，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。