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想要做好重組蛋白表達?如下幾點一定要引起注意

發(fā)表時間:2022-12-14 訪問次數(shù):818

  說到重組蛋白表達,相信大家已經(jīng)不再陌生了,因為在一些藥品的使用中會經(jīng)常使用到。而對于實驗室來說,重組蛋白制備實驗可以說是非常的常見,而且操作起來也非常的規(guī)范。那么,蛋白的制備是不是就非常的簡單了呢?其實不然!在日常重組蛋白表達的實驗中,我們需要注意如下的一些事項。

  1、如何得到可溶性的蛋白

  這個問題也是我們蛋白表達過程中最常見的問題之一,雖然說蛋白表達出來了,但是卻不溶,導(dǎo)致所得蛋白無法使用。一般這個情況,就是因為我們選擇的表達菌株不對,需要更換合適的菌株才行;

  2、如何讓蛋白產(chǎn)量最大化

  主要還是因為溫度的緣故。經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn),在37度的環(huán)境下,蛋白容易出現(xiàn)包涵體,而在30度的時候,可溶性蛋白的產(chǎn)量會提升,15-20度的環(huán)境下,誘導(dǎo)性蛋白的產(chǎn)量會達到最大;

  3、如何避免包涵體和內(nèi)毒素的產(chǎn)生

  包涵體的產(chǎn)生主要是因為蛋白溶解性達到最大后,導(dǎo)致蛋白析出的情況。所以,這個時候我們不妨換個角度,用無細胞表達系統(tǒng)來試試,通過實驗,它不僅能有效避免包涵體、內(nèi)毒素等物質(zhì)的產(chǎn)生,而且蛋白表達率也很高;

  當(dāng)然了,重組蛋白表達需要注意的事項并不止我們說的如上幾個方面,具體操作中很多細節(jié)方面也要引起注意,否則也可能會造成蛋白表達的失敗。當(dāng)然了,按照相關(guān)文獻給與的方式操作下來,一般都不會出現(xiàn)太大問題,只是因為相關(guān)投入與產(chǎn)出難成正比,制備的蛋白無法滿足實驗需求等問題,可能會對您造成困擾。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供重組蛋白制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。